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从豌豆豆清废水中提取抗菌肽及白蛋白方法

公开(公告)日20200417

IPC分类号C02F9/02; C07K14/415; C07K1/14; C07K1/34; C12P21/06; C02F103/32

摘要

本发明公开了一种从豌豆豆清废水中提取抗菌肽及白蛋白的方法,以豌豆蛋白加工过程中产生的豌豆豆清废水为原料,在提取白蛋白时,进行离心分离后,通过控温换热调节原料温度,然后依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤,得到白蛋白浆液;将白蛋白浆液经过多效浓缩后,添加碱性物质调节pH,再经过杀菌和干燥,最终得到白蛋白,实现了对豌豆豆清废水中小分子量的白蛋白的针对性提取,避免了资源浪费。有效回收了豌豆豆清水中的小分子量的白蛋白和抗菌肽,避免对豌豆豆清水处理不当造成的环境污染,实现资源再利用。

权利要求书

1.一种从豌豆豆清废水中提取抗菌肽的方法,其特征在于,以豌豆蛋白加工过程中产生的豌豆豆清废水为原料,进行离心分离后,通过控温换热调节原料温度,然后依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤,得到白蛋白浆液;将白蛋白浆液经过多效浓缩后,添加碱性物质调节pH,再经过杀菌和干燥,得到白蛋白;

将白蛋白加水得到白蛋白浆液之后,进行水浴预处理,冷却后放在恒温磁力搅拌器上搅拌,随后加入木瓜蛋白酶,滴加碱溶液保持酶解液pH不变;充分酶解后,煮沸灭酶,冷却后调节pH 至7.0;离心,上清液进行旋转蒸发浓缩,采用0.22μm的针头式滤膜除菌,得到抗菌肽初产物;

将抗菌肽初产物通过萃取器,该萃取器预先用甲醇水溶液清洗并活化然后用三氟乙酸水溶液清洗并平衡;依次使甲醇水溶液和三氟乙酸水溶液通过上述萃取器并收集穿透液,将穿透液采用旋转蒸发仪真空浓缩,取出抗菌肽浓缩液于-15℃冷冻,然后将结冰的抗菌肽置于真空冷冻干燥机中进行干燥,得到纯化后的抗菌肽;

所述抗菌肽具有如下特征:利用酸度计测定抗菌肽的PH值为2.56-2.78;

所述抗菌肽分子中含有:甘氨酸、半胱氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、丙氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、酪氨酸。

2.一种从豌豆豆清废水中提取白蛋白的方法,其特征在于,以豌豆蛋白加工过程中产生的豌豆豆清废水为原料,进行离心分离后,通过控温换热调节原料温度,然后依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤,得到白蛋白浆液;将白蛋白浆液经过多效浓缩后,添加碱性物质调节pH,再经过杀菌和干燥,得到白蛋白。

3.如权利要求2所述的从豌豆豆清废水中提取白蛋白的方法,其特征在于,具体步骤为:

1)离心分离:以豌豆豆清废水为原料,进行离心分离;

2)控温换热:将离心分离后得到的豆清水进行换热处理;

3)微滤:将换热处理后的豆清水进行微滤处理;

4)纳滤:采用纳滤模组,调节系统压力以及过滤温度,去除93%-95%的水分;

5)超滤:采用超滤膜,经过5-10次洗脱分离,得到粗品白蛋白浆液;

6)二级纳滤:选用抗污染纳滤膜,加入清水洗涤粗品白蛋白,洗涤完成后去除用于洗涤的清水;

7)多效浓缩:将洗涤好的白蛋白浆液,加入到蒸发器中进行蒸发浓缩;

8)中和:在不锈钢罐内添加碱性物质,调节pH;

9)杀菌、干燥。

4.如权利要求2或3所述的从豌豆豆清废水中提取白蛋白的方法,其特征在于,所述控温换热时的温度为40-50℃。

5.如权利要求2或3所述的从豌豆豆清废水中提取白蛋白的方法,其特征在于,所述微滤过程中采用的膜是碳化硅膜或陶瓷膜。

6.如权利要求5所述的从豌豆豆清中提取白蛋白的方法,其特征在于,所述碳化硅膜的孔径为10纳米-30微米。

7.如权利要求2或3所述的从豌豆豆清废水中提取白蛋白的方法,其特征在于,所述纳滤过程中,调节系统压力为18-25bar ,过滤温度为40-65℃。